在國(guó)家明令禁止使用的農(nóng)藥中，目前發(fā)現(xiàn)有殺蟲(chóng)脒、乙酰甲胺磷被高頻檢測(cè)出。由于明令禁止的農(nóng)藥違法成本較高和原藥管制等原因，禁用農(nóng)藥被用來(lái)隱性添加概率反而較小。不法廠商為了通過(guò)增加農(nóng)藥藥效來(lái)占領(lǐng)農(nóng)藥市場(chǎng)，便在隱性添加上大做文章，多種隱性農(nóng)藥同時(shí)添加，大大增加了執(zhí)法抽檢難度。
為此，依據(jù)全國(guó)農(nóng)藥執(zhí)法案和本站多年檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)匯總出25種高頻非法添加農(nóng)藥。
殺螟硫磷、三唑磷、治螟磷、噠螨靈、氯氰菊酯、甲氰菊酯、丁硫克百威、仲丁威、乙酰甲胺磷、氟蟲(chóng)腈、水胺硫磷、高效氯氟氰菊酯、滅多威、毒死蜱、高效氯氰菊酯、吡蚜酮、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、克百威、氯蟲(chóng)苯甲酰胺、喹啉酮、辛硫磷、氟鈴脲、溴蟲(chóng)腈、阿維菌素。
根據(jù)以上25種禁限用農(nóng)藥理化性質(zhì)、儀器適應(yīng)性、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)異同、出峰時(shí)間相近成分干擾，將其分為高效液相色譜（10種）和氣質(zhì)聯(lián)用儀（15種）兩大部分進(jìn)行反復(fù)實(shí)驗(yàn)，得出的試驗(yàn)條件供讀者參考。本方法大的特點(diǎn)是將氣質(zhì)聯(lián)用儀和高效液相色譜統(tǒng)一起來(lái)。
實(shí)驗(yàn)部分
液相色譜實(shí)驗(yàn)部分
（1）儀器
Agilengt 1260高效液相色譜儀，超聲波清洗器。 
（2）試劑
吡蚜酮、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、克百威、氯蟲(chóng)苯甲酰胺、喹啉酮、辛硫磷、氟鈴脲、溴蟲(chóng)腈、阿維菌素（含量均≥99.0%）等10種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品；甲醇（溶劑）色譜純；超純水。 
（3）色譜條件選擇
甲醇-水體系：梯度；色譜柱：250 mm不銹鋼柱；流動(dòng)相洗脫梯度。流速1.0 mL/min；柱溫25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm；進(jìn)樣量：10 μL。混合標(biāo)樣色譜圖及10種標(biāo)樣保留時(shí)間，對(duì)每個(gè)標(biāo)樣按照洗脫條件進(jìn)行了單獨(dú)定位，不再附圖一一列舉。
（4）實(shí)驗(yàn)步驟
標(biāo)樣溶液：配制本實(shí)驗(yàn)室已備有上述10種農(nóng)藥約0.050 0 g/50 mL甲醇溶液。
將10種標(biāo)樣溶液各取2 mL置于50 mL容量瓶中，配置成混合標(biāo)樣，依據(jù)洗脫梯度終得到混合標(biāo)樣色譜圖，并多次進(jìn)樣驗(yàn)證了圖譜的重現(xiàn)性。
10種農(nóng)藥保留時(shí)間：吡蚜酮3.35 min；吡蟲(chóng)啉4.12 min；啶蟲(chóng)脒4.97 min；克百威9.87 min；氯蟲(chóng)苯甲酰胺16.75 min；喹啉酮17.59 min；辛硫磷29.76 min；氟鈴脲32.83 min；溴蟲(chóng)腈33.61 min；阿維菌素44.06 min。
（5）結(jié)論
對(duì)單個(gè)標(biāo)樣洗脫梯度進(jìn)行定位和定性分析，并逐個(gè)確定保留時(shí)間。
在液相色譜排查農(nóng)藥隱性成分中，需按照禁限判定條件稱(chēng)量樣品，然后比對(duì)樣品各組分峰和混合標(biāo)樣峰，以出峰時(shí)間相同相近判定疑似隱性成分添加，后再對(duì)該疑似組分進(jìn)行定量分析。
氣質(zhì)聯(lián)用實(shí)驗(yàn)部分
1）儀器和條件
安捷7890B－5977A氣質(zhì)聯(lián)用儀，氣相色譜柱：30 m×0.25 mm（i.d.）DV－17MS石英毛細(xì)管柱，膜厚0.25 μm（或同等效果的色譜柱）；微量進(jìn)樣器：10 μL；溫度：100℃保持2 min，梯度，由于滅多威出峰時(shí)間較早，設(shè)置溶劑延遲2 min，GC運(yùn)行梯度
氣體流量（mL/min）：載氣（He）1.5；分流比：10∶1；進(jìn)樣體積：10 μL；電離能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四級(jí)桿溫度：150℃；輔助通道溫度：280℃；掃描模式：全掃描；保留時(shí)間。
（2）試劑
殺螟硫磷、三唑磷、治螟磷、噠螨靈、氯氰菊酯、甲氰菊酯、丁硫克百威、仲丁威、乙酰甲胺磷、氟蟲(chóng)腈、水胺硫磷、高效氯氟氰菊酯、滅多威、毒死蜱、高效氯氰菊酯（含量均≥99%）等15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品；阿維菌素乳油樣品；色譜級(jí)丙酮。 
（3）實(shí)驗(yàn)步驟
稱(chēng)取15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品各約0.05 g置于同一試劑瓶中，加入50 mL丙酮，充分溶解制成混合標(biāo)樣，用滴管再取該溶液1.5 mL標(biāo)記樣品瓶I；稱(chēng)取0.25 g阿維菌素1#樣品置于試劑瓶中，加入50 mL丙酮，充分溶解，用滴管再取該溶液1.5 mL標(biāo)記樣品瓶Ⅱ。樣品瓶I和樣品瓶Ⅱ出峰情況
15種農(nóng)藥標(biāo)樣出峰時(shí)間：滅多威2.27 min；乙酰甲胺磷5.9 min；仲丁威7.56 min；治螟磷8.42 min；丁硫克百威9.24 min；殺螟硫磷12.61 min；毒死蜱13.19 min；水胺硫磷13.47 min；氟蟲(chóng)腈14.56 min；三唑磷17.79 min；氟氯菊酯20.91 min；甲氰菊酯21.2 min；高效氯氟氰菊酯22.61 min；噠螨靈23.53 min；高效氯氰菊酯24.95 min。
阿維菌素乳油樣品查出違禁限農(nóng)藥出峰時(shí)間：毒死蜱13.35 min；啶蟲(chóng)脒21.11 min；氯氰菊酯22.66 min。
（4）結(jié)論
經(jīng)過(guò)反復(fù)條件摸索和梯度調(diào)整，得到質(zhì)譜圖。其中滅多威出峰時(shí)間較早，溶劑延遲時(shí)間由初的3.00min改成后的2.00min；乙酰甲胺磷響應(yīng)值較低，實(shí)際操作中可以適量增加標(biāo)準(zhǔn)品劑量，單獨(dú)核對(duì)出峰時(shí)間查找是否含有該成分。 
對(duì)比阿維菌素農(nóng)藥樣品質(zhì)譜圖查出樣品含有三種禁限用農(nóng)藥毒死蜱、啶蟲(chóng)脒、氯氰菊酯，這是一個(gè)典型的非法添加案例。
總論
在排查這25種違禁限用農(nóng)藥時(shí)，與現(xiàn)有文獻(xiàn)不同之處是首先將氣質(zhì)聯(lián)用儀不能檢測(cè)的10種農(nóng)藥放在液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，增加總體排查的可靠性。綜合這10種農(nóng)藥液相色譜國(guó)標(biāo)企標(biāo)分析方法，在流動(dòng)相選擇上用低毒低成本的甲醇而不用乙腈；吸收波長(zhǎng)也是通過(guò)多次反復(fù)試探，終確定為254 nm；鑒于酸性條件和緩沖磷酸鹽可能會(huì)導(dǎo)致部分樣品分解或出峰異常，本次實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相暫不添加任何酸和鹽。氣質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)的15種農(nóng)藥做一個(gè)整體標(biāo)樣質(zhì)譜圖，用于后期樣品精確比對(duì)，一旦發(fā)現(xiàn)可疑成分，迅速用液相色譜對(duì)可疑成分進(jìn)行定量分析。氣質(zhì)聯(lián)用-液相色譜聯(lián)用法。
農(nóng)藥作為控制農(nóng)作物病蟲(chóng)草鼠等有害生物危害的特殊商品，在促進(jìn)農(nóng)業(yè)增加產(chǎn)量和農(nóng)民增收方面發(fā)揮重要作用。如果農(nóng)藥的質(zhì)量不合格或者使用不當(dāng)，則會(huì)導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)，人畜中毒，生態(tài)環(huán)境污染。一個(gè)普通的阿維菌素乳油中居然添加了三種禁限用農(nóng)藥，可見(jiàn)非法添加在實(shí)際農(nóng)藥生產(chǎn)中的嚴(yán)峻性。為此，研究出這套綜合分析方法，目的是通過(guò)降低排查成本，達(dá)到農(nóng)藥非法添加排查普及效果，從而促進(jìn)整個(gè)農(nóng)藥行業(yè)良性發(fā)展。